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細胞計數用臺盼藍染料or AOPI熒光染料?

更新時間:2023-06-13瀏(liu)覽(lan):786次(ci)

細胞(bao)計(ji)數(shu)是(shi)細胞(bao)培(pei)養(yang)過程中(zhong)的重要(yao)步驟,為了(le)解細胞(bao)的濃度、數(shu)量和活(huo)率(lv)等信息,實驗(yan)人員常用臺盼藍染料(liao)或AOPI熒光(guang)染料(liao)對細胞(bao)進(jin)行染色(se)-計(ji)數(shu)。


1、臺盼藍染色法

臺盼藍染色是細(xi)胞計數(shu)中(zhong)常(chang)用的(de)活/死細(xi)胞鑒(jian)定染色方(fang)法之一。


原理(li):正常的活細胞(bao)(bao),胞(bao)(bao)膜結(jie)構(gou)完(wan)(wan)整(zheng),能夠(gou)排斥臺盼藍,細胞(bao)(bao)不被染色;而死細胞(bao)(bao)的胞(bao)(bao)膜不完(wan)(wan)整(zheng),通透性增加,死細胞會被染成藍色,利用臺盼藍染料的特性便可區分活/死細胞。

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缺點

1-臺盼(pan)藍對細(xi)胞有(you)(you)毒害(hai)作用,會致死有(you)(you)損傷的細(xi)胞,導致細(xi)胞活性檢測結(jie)果(guo)有(you)(you)所偏差;

2-細胞碎(sui)片多(duo)、雜質(zhi)多(duo)等(deng)情況下,無(wu)法進行準確計數(shu)。

 

適(shi)用細胞(bao)種類:培養系細胞。


2、AOPI染色法

當細胞(bao)樣品中的雜質過多,明場下無法進(jin)行(xing)準確計(ji)數時(shi),我們可以在熒(ying)光(guang)通道下,用AOPI熒(ying)光(guang)染料對細胞(bao)進(jin)行(xing)染色。

 

原理:AOPI熒光染料因其只與DNA和RNA結合的特性——既活細(xi)胞(bao)呈現綠色,死細(xi)胞(bao)呈現紅(hong)色,利用AOPI染色法,可排除雜質對目標細胞的干擾,快速區分活/死細胞。

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優點:排除紅細(xi)胞(bao)、血小板、細(xi)胞(bao)碎片等雜質(zhi)對(dui)目標細(xi)胞(bao)的干(gan)擾。


缺(que)點:與臺盼藍(lan)試劑相(xiang)比,成本較高。


適用細胞種(zhong)類:免疫(yi)細胞、原代細胞、血液(ye)細胞等(deng)。

 

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