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實用干貨 | 酵母細胞如何有效計數?

更新時(shi)間(jian):2023-10-26瀏覽:655次

酵(jiao)母(mu)細胞(bao)(bao),也(ye)稱酵(jiao)母(mu)菌,在完(wan)成酵(jiao)母(mu)細胞(bao)(bao)的制備(bei)后,科研人員需對酵(jiao)母(mu)細胞(bao)(bao)的數量、死活、大小(xiao)等進行測定,觀測酵(jiao)母(mu)細胞(bao)(bao)的生長狀態。

目前(qian)酵母細(xi)胞可應用于食品(pin)工業、醫藥研究等領域,其(qi)中畢(bi)赤酵母細(xi)胞表達(da)體(ti)系是(shi)目前(qian)已知酵母體(ti)系中表現(xian)ZuiHao的蛋白表達(da)體(ti)系之一,可被用于納米抗體(ti)等醫藥疫苗(miao)方面。

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亞甲基藍染色法+人工顯微鏡計數(傳統方法)

傳統對酵母細胞的計數是以《國標:GB/T20886-2007,食品加工用酵母》為計數規則,使用亞甲基藍染色的方法,通過高倍數的顯微鏡和血細胞計數板-對酵母細胞進行人工觀測計數。

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但亞甲基藍染料存(cun)在(zai)部分酵母細胞(bao)無(wu)法正常染色、染色時間長,且人工計數(shu)存(cun)在(zai)操作過程繁瑣、計數(shu)不(bu)準確、數(shu)據無(wu)法追溯等缺陷。



熒光酵母細胞計數儀+AOPI熒光染料 (新方法)

熒光酵母細胞計數儀,利用AOPI雙色熒光染色的方法,更加準確地得出酵母細胞的數量和活率,相比于人工顯微鏡計數操作更便捷、計數時間更短、數據可追溯等。

前期準備示意圖.jpg

前(qian)期(qi)準(zhun)備熒光酵母細胞計數儀-細胞計數片-酵母細胞樣品-AOPI熒光染料-移液器


操作流程(cheng)

1-用移液器,按11比例取酵母細胞樣品和AOPI熒光染料

2-用移液器反復吹打幾次,混勻后,取10uL細胞樣品,加樣至細胞計數片

3-上樣(yang)后,選擇相對應的細胞(bao)樣(yang)品類型

4-點擊“開始計數"——“查看數據"即可(全程(cheng)自動(dong)化操作,可實時觀察(cha)細胞圖像)


儀器(qi)介紹

JSY-FL-052型熒光酵母細胞計數儀,高倍放大光學系統,雙色熒光通道,對直徑≥1um的酵母細胞進行精準計數分析。

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儀器實(shi)拍細胞圖

1-釀酒酵母細胞(識(shi)別(bie)圖)





2-畢赤酵母細胞(識別圖)



詳情數據(ju)

計數結果包括總細胞濃度、活/死細胞濃度、活/死細胞比率、總細胞聚團率/濃度、活細胞聚團率/濃度、死細胞聚團率/濃度、活/死細胞直徑等計數結果、原始圖片、識別圖片、報告單等


 

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